1.脂滴诱导实验背景介绍：

脂滴是细胞重要脂质贮存细胞器，机体脂质代谢失衡会诱发脂肪肝、动脉粥样硬化等脂质蓄积相关疾病，体内动物造模周期长、干扰因素多，为便捷探究脂代谢调控机制与药物降脂效果，依托体外细胞培养技术，采用脂肪酸、激素类试剂模拟体内高脂病理环境建立脂滴诱导细胞模型，现已成为脂代谢、降脂药物筛选及脂质相关疾病机理研究的经典体外实验手段。

利用油酸、胰岛素、糖皮质激素等诱导物干预细胞，上调脂肪酸摄取与甘油三酯合成通路，打破细胞脂质代谢平衡，促使中性脂质在内质网组装形成脂滴并积聚；该实验旨在体外构建脂质蓄积细胞模型，用于探究脂滴生成调控机制、筛选降脂活性物质，同时模拟脂肪肝、泡沫细胞等病理细胞表型，为脂质代谢相关疾病的机理与药物研发提供体外研究载体。

2.脂滴诱导实验的意义：

中脂滴诱导实验可在体外快速复刻细胞脂质异常蓄积的病理状态，规避动物体内复杂内环境干扰、缩短建模周期，既能用于解析脂滴生成、脂质代谢紊乱的分子机制，也可高效筛选降脂活性药物与功能性物质，为非酒精性脂肪肝、动脉粥样硬化等脂代谢相关疾病的发病机理探究、新药研发及病理机制研究提供关键体外实验依据。

3.脂滴诱导实验过程：

实验时间：

2026年05月28日 15：10-17：13

实验设备及厂家：

CELLImage Mini全自动活细胞成像仪（联庆瑞奇）、离心机（国产）、恒温水浴锅（国产）

实验耗材及厂家：

六孔板（国产）

实验试剂：

培养基（逸漠生物）、小牛血清（逸漠生物）、青链霉素溶液（逸漠生物）、胰蛋白酶（逸漠生物）、脂滴绿色荧光检测试剂盒（国产）、细胞脂滴诱导试剂盒(油酸BSA复合物)

细胞类型：

A549（逸漠生物）、3T3-L1（逸漠生物）

3.1脂滴诱导实验步骤：

（1）实验准备：将配好的完全培养基和胰蛋白酶从2-8℃ 中取出放置到水浴箱预热30 min 左右。并对生物安全柜紫外照射消杀30min；

（2）观察细胞：将细胞放置于CELLImage Mini全自动活细胞成像仪观察细胞的状态及密度，细胞融合度达到 80%-90%即可进行传代；

（3）细胞传代：将生长对数期的细胞消化收集于15ml离心管，离心去上清，重悬细胞进行计数，按照1:4的比例进行铺板，在六孔板中将每种细胞种2个孔，于37°C、5%CO2 饱和湿度培养箱内培养24h；

（4）诱导试剂配制：次日，按照说明书将Oleate-BSA Complex (10X)用细胞完全培养液稀释至适宜的浓度，取200μl Oleate-BSA Complex (10X)，加入1800μl细胞完全培养液，混匀即得2ml 1X Oleate-BSA Complex;

（5）脂滴诱导：弃去原细胞培养液，弃去原细胞培养液，分别加入配制好的Oleate-BSA Complex，置于培养箱中孵育18-48小时，根据实验设计进行后续检测；

（6）脂滴荧光检测试剂配制：根据说明书，配制4毫升脂滴染色工作液；

（7）脂滴染色：取出待检测的细胞，PBS洗涤1-2遍，吸除PBS，每孔加入1ml体积的Staining Solution染色工作液，，室温下避光孵育10-20分钟；PBS洗涤两遍；

 

3.2 荧光检测：

将染色好的六孔板放置于CELLImage Mini全自动活细胞成像仪适配器上，选择适合的点位分别对两种细胞进行明场、绿色荧光和蓝色荧光脂滴诱导和未诱导的细胞孔进行图像采集，共计采集实验组和对照组各12个自由点位。

3.3 实验结果图像展示:

（1） A549细胞脂滴诱导图像：

A549经过诱导图像（明场+蓝荧光+绿荧光）

 

A549经过诱导图像（蓝荧光+绿荧光）

 

A549未经过诱导图像（明场+蓝荧光+绿荧光）

 

A549未经过诱导图像（蓝荧光+绿荧光）

 

 

（2） 3T3-L1脂滴诱导图像：

3T3-L1经过诱导图像（明场+蓝荧光+绿荧光）

 

3T3-L1经过诱导图像（蓝荧光+绿荧光）

 

3T3-L1未经过诱导图像（明场+蓝荧光+绿荧光）

 

3T3-L1未经过诱导的脂滴染色图像（蓝荧光+绿荧光）

 

 

实验总结

CELLImage Mini全自动活细胞成像仪在细胞培养箱内实现动态监测2D细胞、3D细胞（类器官、肿瘤球等）实验全程的生长变化信息，实现动态研究调控物质对细胞的影响；支持红绿蓝三通道荧光，记录细胞中不同荧光标签的动态变化；支持活细胞Z轴层扫叠加、大图拼接，实现多层次、大范围记录3D细胞（类器官、肿瘤球等）的变化信息；搭配多种扫描模式、AI分析功能，实现细胞培养箱内细胞实验的智能管理，全自动、长时程、高通量、无干扰的记录细胞生长变化并分析图像信息，快来联系我们体验吧。