回顾小编培养细胞的过程，其中小鼠的黑色素瘤细胞（B16）用DMEM培养基培养时会产生大量黑色素，使得其离心后离心管底部细胞呈黑色。那么现在小编就有疑问了，人恶性黑色素瘤细胞（A375）会产生黑色素吗？离心下来细胞颜色会是黑色的吗？能做络氨酸酶抑制实验吗？

    人恶性黑色素瘤细胞A-375 [A375]来源于一名罹患黑色素瘤的54岁女性的皮肤组织，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH Swiss小鼠中形成类似于恶性黑素瘤的快速增殖的皮下肿瘤。A-375细胞本身带有BRAF Val600Glu (c.1799T>A)突变，是NRAS 突变-A375理想对照，可用于细胞三维培养、高通量筛选、毒理学和免疫肿瘤学研究，也是一种合适的转染宿主。据报道，该细胞在裸鼠体内成瘤，也可以在成纤维细胞饲养层和琼脂上形成克隆。

 

A375细胞简介：

中文名称 ：人恶性黑色素瘤细胞

细胞简称 ：A375

细胞形态 ：上皮细胞样

生长特性 ：贴壁细胞

组织来源 ：皮肤组织

组织来源 ：皮肤组织

换液频率：2~3次/周

培养环境 ：95%空气+5%CO2 在37℃培养

冻存条件 ：90% FBS+10% DMSO冻存于液氮

完全培养基 ：DMEM＋10% F B S＋1% P /S

 

A375细胞特点：

    1、细胞颗粒感较重

    细胞传代培养时细胞内黑点及细胞外颗粒较多，建议使用优质血清及培养基培养细胞；

    2、传代、复苏注意细胞状态

    细胞消化或者复苏操作不当容易导致细胞死亡裂解产生大量碎片及颗粒，进而影响活细胞状态，注意消化或复苏过程尽量轻柔，严格控制消化时间和复苏操作规范，传代或复苏24h后建议观察细胞，建议换液一次去除死亡细胞。

最后针对小编最初的疑问，经过一段时间对人恶性黑色素瘤细胞培养，也得到了答案，在此小小的总结了一下。

    人恶性黑色素瘤细胞（A375）会产生黑色素，但是离心下来细胞颜色会是白色，细胞内的黑色颗粒是细胞外分泌泡及细胞器折光，这个属于细胞自身特性，无法清除也无法改变，大部分细胞都会有这种现象，只是不同细胞颗粒多少有区别，细胞培养体系不适应、营养缺乏、渗透压异常等均可能导致细胞内颗粒增加，建议使用合适的培养条件。最后查阅相关文献资料得出该细胞能做络氨酸酶抑制实验的结论[1]。

 

CELLImage 10X 镜头观察：

      1、A375细胞0h时序图像

    2、A375细胞6h时序图像

    3、A375细胞12h时序图像

    4、A375细胞18h时序图像

    5、A375细胞24h时序图像

    6、A375细胞30h时序图像

    7、A375细胞36h时序图像

    8、A375细胞42h时序图像

    9、A375细胞48h时序图像

    10、分析时序图像融合度形成⽣⻓曲线图

    ✴[1]丛蓉.利⽤siRNA技术抑制⼈⿊⾊素瘤细胞酪氨酸酶活性的研究[D]. 华东师范⼤学,2007.DOI:CNKI:CDMD:2.2007.082233。